发布单位:上海晶抗生物工程有限公司 发布时间:2024-6-24
小鼠早期生长反应蛋白4(egr4)elisa试剂盒中常用的酶一般都用此法交联。它具有操作简便、有效(结合率达60%-70%)和重复性好等优点。缺点是交联反应是随机的,酶与抗体交联时分子间的比例不严格,结合物的大小也不均一,酶与酶,抗体与抗体之间也有可能交联,影响效果。在两步法中,先将酶与戊二醛作用,透析除去多余的戊二醛后,再与抗体作用而形成酶标抗体。也可先将抗体与戊二醛作用,再与酶联结。两步法的产物中绝大部分的酶与蛋白质是以1:1的比例结合的,较一步法的酶结合物更有助于本底的-以提高敏感度,但其偶联的有效率较一步法低。
1.小鼠早期生长反应蛋白4(egr4)elisa试剂盒实验需要多长时间?
双抗体夹心elisa法次实验需要3.5-4小时,竞争elisa法次实验需要2-2.5小时。
2.血清样本如何处理?
全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
3. 血浆样本如何处理?
建议选择edta或者柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
4.细胞上清液样本如何处理?
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。
5.细胞裂解液样本如何处理?
检测细胞内的成份时,用pbs(ph7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6.组织样本如何处理?
用预冷的psb (0.01m,ph=7.4)冲洗组织,以去除残留-(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的pbs(般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9ml的pbs,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
7.
实验结果不理想请及时与或技术支持联系,我们可以帮您起分析实验结果。如果仅凭实验数据无法判断,您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。由于篇幅有限,了解详情请关注“晶抗生物"微信公众号或,也可以联系我司工作人员了解详情。